די וויכטיקייט פון PCR טערמאַל ציקלער קאַליבראַציע

די פּאָלימעראַזע קייט רעאַקציע (PCR) האט רעוואלוציאנירט מאָלעקולאַרע ביאָלאָגיע, דערלויבנדיק וויסנשאַפטלער צו אַמפּליפיצירן ספּעציפֿישע דנ״אַ סיקוואַנסן מיט אַמייזינג פּינקטלעכקייט און עפעקטיווקייט. אין האַרצן פון דעם פּראָצעס איז דער PCR טערמאַל ציקלער, אַ קריטישער אינסטרומענט וואָס קאָנטראָלירט די טעמפּעראַטור ציקלען וואָס זענען פארלאנגט פֿאַר דנ״אַ דענאַטוראַציע, אַנילינג און עקסטענשאַן. אָבער, די עפעקטיווקייט פון אַ PCR טערמאַל ציקלער דעפּענדס שטאַרק אויף זיין קאַליבראַציע. דער אַרטיקל אויספאָרשט די וויכטיקייט פון PCR טערמאַל ציקלער קאַליבראַציע און זיין השפּעה אויף עקספּערימענטאַלע רעזולטאַטן.

קאַליבראַציע פון ​​אַפּי-סי-אַר טערמישער ציקלערזיכערט אז דער אפאראט ארבעט אינעם באשטימטן טעמפעראטור ראיאן און האלט די גענויקייט וואס איז נויטיג פאר א געלונגענע פארגרעסערונג. טעמפעראטור קאנטראל איז קריטיש אין PCR ווייל יעדער שריט פונעם ציקל פארלאזט זיך אויף גענויע טערמישע באדינגונגען. למשל, בעת דער דענאטוראציע פאזע, מוזן די DNA שטריקלעך ווערן געהייצט צו ארום 94-98°C צו זיי צעשיידן. אויב די טעמפעראטור איז צו נידעריג, קען פארקומען אומפארענדיגטע דענאטוראציע, וואס רעזולטירט אין אומעפעקטיווע פארגרעסערונג. פארקערט, אויב די טעמפעראטור איז צו הויך, קען עס שאטן די DNA אדער די ענזימען וואס ווערן גענוצט אין דער רעאקציע.

דערצו, דער אנילינג שריט פארלאנגט א ספעציפישע טעמפעראטור, וואס ווערט געווענליך באשטימט דורך די שמעלץ טעמפעראטור פון די פריימערס וואס ווערן גענוצט. אויב דער טערמאל ציקלער איז נישט קאליברירט ריכטיג, קען די אנילינג טעמפעראטור זיין נישט גוט, וואס רעזולטירט אין נישט-ספעציפישע בינדונג אדער א גאנצן מאנגל אין בינדונג. דאס קען רעזולטירן אין נידעריגע ייעלדס אדער פארגרעסערונג פון נישט-געוואונטשע פראדוקטן, וואס לעצטendlich קאמפראמיטירט די אינטעגריטעט פון דעם עקספערימענט.

רעגולערע קאליבראציע פון ​​PCR טערמאלע ציקלערס איז וויכטיג צו אויפהאלטן פארלעסלעכע און רעפראדוצירבארע רעזולטאטן. מיט דער צייט קענען טערמאלע ציקלערס אפדריפן זייערע קאליבראציע סעטינגס צוליב פאקטארן ווי אפנוץ, סביבה ענדערונגען, און אפילו מאכט צושטעל פלוקטואציעס. רעגולערע קאליבראציע טשעקס קענען העלפן אידענטיפיצירן די אונטערשיידן און זיכער מאכן אז דער אינסטרומענט ארבעט אפטימאל. דאס איז ספעציעל וויכטיג אין פארשונג סביבות וואו גענויע מעסטונגען זענען קריטיש, ווי למשל אין קלינישע דיאגנאסטיקס, גענעטישע פארשונג, און פארענסישע אנאליז.