זומער וויסנשאפט גייד: ווען א 40°C היץ כוואַליע טרעפט מאָלעקולאַרע עקספּערימענטן

הויכע טעמפּעראַטורן האָבן זיך לעצטנס אָנגעהאַלטן איבער אַ גרויסן טייל פון כינע. דעם 24סטן יולי האָט די שאַנדאָנג פּראָווינציאַלע מעטעאָראָלאָגישע אָבסערוואַטאָריע אַרויסגעגעבן אַ געלע הויך טעמפּעראַטור וואָרענונג, פאָרויסזאָגענדיג "סאַונה-ווי" טעמפּעראַטורן פון 35-37°C (111-133°F) און 80% הומידיטי פֿאַר די קומענדיקע פיר טעג אין אינלענדישע געביטן. טעמפּעראַטורן אין ערטער ווי טורפּאַן, שינדזשאַנג, דערנענטערן זיך צו 48°C (111-133°F). וווהאַן און קסיאַאָגאַן, הובעי, זענען אונטער אַן אָראַנדזשע וואָרענונג, מיט טעמפּעראַטורן וואָס איבערשטייגן 37°C אין עטלעכע געביטן. אין דער ברענענדיקער היץ, דערפאַרט די מיקראָסקאָפּישע וועלט אונטער דער ייבערפלאַך פון פּיפּעטן ומגעוויינטלעכע שטערונגען - די סטאַביליטעט פון נוקלעאיק זויערן, די טעטיקייט פון ענזימען, און דער פיזישער צושטאַנד פון רעאַגענטן ווערן אַלע שטילערהייט פאַרדרייט דורך דער היץ-כוואַליע.

נוקלעאיק זויער עקסטראקציע איז געווארן א פארמעסט קעגן צייט. ווען די דרויסנדיגע טעמפעראטור איבערשטייגט 40°C, אפילו מיטן לופטקילונג אנגעצונדן, שוועבט די טעמפעראטור פונעם אפעראציע טיש אפט העכער 28°C. אין דעם צייט, דעגראַדירן RNA מוסטערן וואס ווערן איבערגעלאזט אין דער אפענער לופט מער ווי צוויי מאל אזוי שנעל ווי אין פרילינג און הארבסט. ביי מאגנעטישע בעד עקסטראקציע, ווערט די בופער לייזונג לאקאל געזעטיקט צוליב פארשנעלערטן פארפליכטונג פונעם לייזונג, און קריסטאלן ווערן גרינג אויסגעפירט. די קריסטאלן וועלן פאראורזאכן גרויסע וואקלענישן אין דער עפעקטיווקייט פון נוקלעאיק זויער כאפן. די וואלאטיליטעט פון ארגאנישע לייזונגען וואקסט גלייכצייטיג. ביי 30°C, וואקסט די מאס פון כלאָראָפאָרם פארפליכטונג מיט 40% קעגן 25°C. בעתן אפעראציע, איז נויטיק צו זיכער מאכן אז די ווינט גיכקייט אין דער פארם קאַפּטשער איז 0.5m/s, און ניצן ניטריל הענטשקעס צו האלטן די שוץ עפעקטיווקייט.

PCR עקספערימענטן שטייען פאר נאך מער קאמפליצירטע טעמפעראטור שטערונגען. רעאגענטן ווי טאק ענזיים און רעווערס טראנסקריפטאז זענען גאר סענסיטיוו צו פלוצלינגע טעמפעראטור וואקלונגען. קאנדענסאציע אויף די רער ווענט נאך ארויסנעמען פון א -20°C פריזער קען פאראורזאכן איבער 15% ענזיים אקטיוויטעט פארלוסט אויב עס גייט אריין אין די רעאקציע סיסטעם. dNTP לייזונגען קענען אויך ווייזן דעטעקטירבארע דעגראדאציע נאך בלויז 5 מינוט פון אויסשטעלונג צו צימער טעמפעראטור (>30°C). אינסטרומענט אפעראציע ווערט אויך געשטערט דורך הויכע טעמפעראטורן. ווען די לאבאראטאריע אמביענט טעמפעראטור איז >35°C און די היץ דיסיפאציע קלירענס פון די PCR אינסטרומענט איז נישט גענוגיק (<50 סענטימעטער פון די וואנט), קען דער אינערליכער טעמפעראטור חילוק דערגרייכן אזויפיל ווי 0.8°C. די אפוויכונג קען פאראורזאכן אז די פארשטארקונג עפעקטיווקייט ביים ברעג פון א 96-ברונעם טעלער זאל פאלן מיט איבער 40%. שטויב פילטערס זאלן רעגולער גערייניקט ווערן (שטויב אקומולאציע פארקלענערט היץ דיסיפאציע עפעקטיווקייט מיט 50%), און דירעקטע לופטקילונג זאל פארמיידט ווערן. דערצו, ווען מען פירט אויס PCR עקספערימענטן איבערנאכט, פארמיידט צו ניצן די PCR אינסטרומענט ווי א "מאלווייזער פרידזשידער" צו האלטן מוסטערן. סטאָרידזש ביי 4°C פֿאַר מער ווי 2 שעה קען פאַראורזאַכן קאָנדענסאַציע צו פאָרמירן זיך נאָכדעם וואָס דער הייסער דעקל שליסט זיך, וואָס קען פֿאַרדיןען די רעאַקציע סיסטעם און מעגלעך קאָראָדירן די מעטאַל מאָדולן פֿונעם אינסטרומענט.

קאָנפראָנטירט מיט אנהאַלטנדיקע הויך-טעמפּעראַטור וואָרענונגען, זאָלן מאָלעקולאַרע לאַבאָראַטאָריעס אויך לאָזן אַ שרעק. טייערע RNA מוסטערן זאָלן זיין געהאלטן אין דער הינטערשטער טייל פון אַ -80°C פריזער, מיט צוטריט באַגרענעצט צו הויך-טעמפּעראַטור פּעריאָדן. עפענען די טיר פון אַ -20°C פריזער מער ווי פינף מאָל אַ טאָג וועט פאַרשטאַרקן טעמפּעראַטור פלוקטואַציעס. הויך-היץ-גענערירנדיק ויסריכט ריקווייערז לפּחות 50 סענטימעטער פון היץ דיסיפּיישאַן פּלאַץ אויף ביידע זייטן און הינטערשטע זייטן. דערצו, איז רעקאָמענדירט צו ריסטראַקטשערירן עקספּערימענטאַל טיימינג: 7:00-10:00 AM פֿאַר טעמפּעראַטור-סענסיטיווע אַפּעריישאַנז אַזאַ ווי RNA עקסטראַקציע און qPCR לאָודינג; 1:00-4:00 PM פֿאַר ניט-עקספּערימענטאַל אַרבעט אַזאַ ווי דאַטן אַנאַליסיס. די סטראַטעגיע קען עפעקטיוו פאַרמייַדן הויך-טעמפּעראַטור שפּיצן פון ינטערפיראַנס מיט קריטישע טריט.

מאָלעקולאַרע עקספּערימענטן בעת ​​אַ היץ־כוואַליע זענען אַ פּראָבע פֿון ביידע טעכניק און געדולד. אונטער דער אומדערמידלעכער זומער־זון, אפשר איז עס צייט אַראָפּצולייגן אייער פּיפּעטע און צולייגן אַן עקסטרע קעסטל אייז צו אייערע מוסטערן כּדי צו לאָזן דעם אינסטרומענט פֿאַרשפּרייטן מער היץ. די רעספּעקט פֿאַר טעמפּעראַטור־פֿלוקטואַציעס איז פּונקט די מערסט ווערטפֿולע לאַבאָראַטאָריע־קוואַליטעט בעת די הייסע זומער־חדשים — נאָך אַלץ, אין דער 40°C היץ פֿון זומער, דאַרפֿן אפילו מאָלעקולן אַ קערפֿול באַוואכטע "קינסטלעכע פּאָלאַרע געגנט".