PCR אַנאַליזער טראָובלעשאָאָטינג: אָפט געשטעלטע פֿראגן און סאַלושאַנז

פּאָלימעראַסע קייט אָפּרוף (PCR) אַנאַליסערס זענען יקערדיק מכשירים אין מאָלעקולאַר ביאָלאָגי, אַלאַוינג ריסערטשערז צו פאַרגיכערן דנאַ פֿאַר אַפּלאַקיישאַנז ריינדזשינג פון גענעטיק דעראַגישאַנז צו קליניקס צו קליניש דיאַגנאָסטיק צו קליניש דיאַגנאָסטיק צו קליניש דיאַגנאָסטיק צו קליניש דיאַגנאָסטיקס ריינדזשאַז. אָבער, ווי קיין קאָמפּלעקס מיטל, אַ PCR אַנאַליזער קענען טרעפן פּראָבלעמס וואָס ווירקן זייַן פאָרשטעלונג. דער אַרטיקל ווענדט עטלעכע פּראָסט פֿראגן וועגןPCR אַנאַליזערטראָובלעשאָאָטינג און פּראָווידעס פּראַקטיש סאַלושאַנז צו פּראָסט פּראָבלעמס.

1. פארוואס איז מיין פּקר ענטפער נישט אַמפּלאַפייינג?

איינער פון די מערסט פּראָסט פּראָבלעמס פייסט דורך ניצערס איז די ינאַביליטי פון די פּקר אָפּרוף צו פאַרגיכערן די ציל דנאַ. דאָס קען זיין אַטריביאַטאַד צו עטלעכע סיבות:

פאַלש אָנפאַנגער פּלאַן: מאַכט זיכער אַז דיין אָנפאַנגען זענען ספּעציפיש פֿאַר די ציל סיקוואַנס און האָבן אַ אָפּטימאַל מעלטינג טעמפּעראַטור (טם). ניצן ווייכווארג מכשירים פֿאַר אָנפאַנגער פּלאַן צו ויסמייַדן נאַנספּאַסיפיק ביינדינג.

ניט גענוג מוסטער דנאַ: באַשטעטיקן אַז איר נוצן אַ גענוג סומע פון ​​מוסטער דנאַ. צו קליין וועט רעזולטאַט אין שוואַך אָדער קיין אַמפּלאַפאַקיישאַן.

ינכיבאַטערז אין דער מוסטער: קאַנטאַמאַנאַנץ אין דער מוסטער קען ינכיבאַט די פּקר אָפּרוף. באַטראַכטן רייניקונג דיין דנאַ אָדער ניצן אַ פאַרשידענע יקסטראַקשאַן אופֿן.

לייזונג: קאָנטראָלירן דיין אָנינער פּלאַן, פאַרגרעסערן מוסטער קאַנסאַנטריישאַן, און מאַכן זיכער אַז דיין מוסטער כּולל ניט ינכיביאַטערז.

2. פארוואס איז מיין פּקר פּראָדוקט די פאַלש גרייס?

אויב דיין פּקר פּראָדוקט גרייס איז נישט ווי דערוואַרט, עס קען אָנווייַזן אַ פּראָבלעם מיט די אָפּרוף טנאָים אָדער ינגרידיאַנץ געניצט.

ניט-ספּעציפיש אַמפּלאַפאַקיישאַן: דאָס קען פּאַסירן אויב אַ אָנפאַנגער ביינדז צו אַ אַנינטענדיד פּלאַץ. קאָנטראָלירן די ספּעסיטאַטי פון די פּרימערס ניצן אַ געצייַג אַזאַ ווי בלאַסט.

פאַלש אַנילינג טעמפּעראַטור: אויב די אַנילינג טעמפּעראַטור איז אויך נידעריק, ניט-ספּעציפיש ביינדינג קען רעזולטאַט. אָפּטימיזאַטיאָן פון אַנילינג טעמפּעראַטור דורך גראַדיענט פּקר.

לייזונג: באַשטעטיקן אָנפאַנגער ספּעציפיש און אָפּטימיזע אַננישע טעמפּעראַטור צו פֿאַרבעסערן די אַקיעראַסי פון פּקר פּראָדוקטן.

3. מייַן פּקר אַנאַליזער דיספּלייז אַ טעות אָנזאָג. וואָס זאָל איך טאָן?

טעות אַרטיקלען אויף אַ פּקר אַנאַליזער קענען זיין אַלאַרמינג, אָבער זיי קענען אָפט צושטעלן קלוז צו פּאָטענציעל פּראָבלעמס.

קאַלאַבריישאַן ישוז: מאַכט זיכער אַז די פּקר אַנאַליזער איז קאַלאַברייטיד ריכטיק. רעגולער וישאַלט און קאַלאַבריישאַן טשעקס זענען קריטיש צו באַקומען פּינטלעך רעזולטאַטן.

ווייכווארג גרופע: עטלעכע מאָל, ווייכווארג קענען גרונט פּראָבלעמס. ריסטאַרט דיין קאָמפּיוטער און קאָנטראָלירן פֿאַר ווייכווארג דערהייַנטיקונגען.

לייזונג: אָפּשיקן צו די באַניצער מאַנואַל פֿאַר די ספּעציפיש טעות קאָד און נאָכגיין די רעקאַמענדיד טראָובלעשאָאָטינג סטעפּס. רעגולער וישאַלט קענען פאַרמייַדן פילע פּראָבלעמס.

4. פארוואס זענען מיין פּקר אָפּרוף רעזולטאַטן סתירה?

סתירה פּק רעזולטאַטן קענען זיין פראַסטרייטינג פֿאַר עטלעכע סיבות:

רייידזשאַנט קוואַליטעט: ענשור אַז אַלע רייידזשאַנץ, אַרייַנגערעכנט ענזימעס, באַפערז, און דנץ, זענען פריש און הויך קוואַליטעט. אויסגעגאנגען אָדער קאַנטאַמאַנייטאַד רייידזשאַנץ קען פאַרשאַפן ווערייאַבילאַטי.

טערמאַל סייקלאָטער קאַלאַבריישאַן: סתירה טעמפּעראַטור סעטטינגס קען ווירקן די פּקר פּראָצעס. קאָנטראָלירן קעסיידער די קאַלאַבריישאַן פון די טערמאַל סייקלאָטער.

לייזונג: ניצן הויך-קוואַליטעט רייידזשאַנץ און קאַלאַברייט דיין טערמאַל סייקלאָטער קעסיידער צו ענשור קאָנסיסטענט רעזולטאַטן.

5. ווי צו פֿאַרבעסערן פּק אָפּרוף עפעקטיווקייַט?

ימפּרוווינג די עפעקטיווקייַט פון פּקר ריאַקשאַנז קענען פירן צו העכער ייעלדס און מער פאַרלאָזלעך רעזולטאַטן.

אָפּטימיזע אָפּרוף באדינגונגען: עקספּערימענט ניצן פאַרשידענע קאַנסאַנטריישאַנז פון אָנפאַנגען טעמפּלאַט דנאַ און MGCL2. יעדער פּקר אָפּרוף קען דאַרפן יינציק טנאָים פֿאַר אָפּטימאַל פאָרשטעלונג.

ניצן הויך-פאַדעלאַטי ענזימעס: אויב אַקיעראַסי איז קריטיש, באַטראַכטן ניצן אַ הויך-פאַדעלאַטי דנאַ פּאָלימעראַסע צו מינאַמייז ערראָרס בעשאַס אַמפּלאַפאַקיישאַן.

לייזונג: דורכפירן אַ אָפּטימיזאַטיאָן עקספּערימענט צו געפֿינען די בעסטער טנאָים פֿאַר דיין ספּעציפיש PCR סעטאַפּ.

אין קיצער

טראָובלעשאָאָטינג אַPCR אַנאַליזערקענען זיין אַ דאָנטינג אַרבעט, אָבער איר פֿאַרשטיין פּראָסט פּראָבלעמס און זייער סאַלושאַנז קענען פֿאַרבעסערן דיין PRRRCH פֿאַרבעסערן ימפּרוווד. דורך סאַלווינג די פּראָסט פּראָבלעמס, ריסערטשערז קענען פֿאַרבעסערן פּטר רעזולטאַטן און ענשור פאַרלאָזלעך רעזולטאַטן אין מאָלעקולאַר ביאָלאָגי אַפּלאַקיישאַנז. רעגולער וישאַלט, אָפּגעהיט סעלעקציע פון ​​רייידזשאַנץ, און אָפּטימיזאַטיאָן פון אָפּרוף טנאָים זענען שליסלען צו הצלחה פּטר אַנאַליסיס.